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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:Sure

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 產(chǎn)品廠商:乾思生物
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
Sure
詳情介紹:

感受態(tài)細(xì)胞基本信息

出品公司: Stratagene
感受態(tài)細(xì)胞名稱: Sure感受態(tài)細(xì)胞
菌株類(lèi)型: E.coli
產(chǎn)品目錄號(hào): 200238
培養(yǎng)基: LB培養(yǎng)基
生長(zhǎng)條件: 37 ℃,  有氧
基因型: Sure感受態(tài)細(xì)胞菌株基因型
抗性: 卡那,四環(huán)素
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化條件: 42 ℃熱激
應(yīng)用: 克隆菌株
誘導(dǎo)方法: --
菌株特點(diǎn):
SURE(Stop Unwanted Rearrangement Events)感受態(tài)細(xì)胞是設(shè)計(jì)用來(lái)克隆在傳統(tǒng)菌株中無(wú)法克隆的DNA片段序列的菌株。SURE感受態(tài)菌株缺乏催化重組和刪除非標(biāo)準(zhǔn)二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu), 例如十字形(由反向重復(fù)序列導(dǎo)致)和Z字形的DNA序列的組件。這些非標(biāo)準(zhǔn)二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)在真核細(xì)胞中經(jīng)常出現(xiàn),而且這些結(jié)構(gòu)能夠阻礙真核細(xì)胞DNA 在傳統(tǒng)菌株中的克隆。sure感受態(tài)細(xì)胞是限制性內(nèi)切酶陰性的(McrA-, McrCB-, McrF-, Mrr-, HsdR-),核酸內(nèi)切酶(endA)缺陷,和重組酶(recB recJ)缺陷的。同時(shí)sure感受態(tài)細(xì)胞中所具有的F´ 游離基因上面的lacIqZΔM15基因,使得能夠利用藍(lán)白斑進(jìn)行克隆篩選。

SURE感受態(tài)細(xì)胞主要是用來(lái)克隆不穩(wěn)定DNA結(jié)構(gòu), 大腸桿菌DNA修復(fù)系統(tǒng)會(huì)針對(duì)重復(fù)序列、二級(jí)結(jié)構(gòu)(如Z-DNA)等真核DNA進(jìn)行重排或刪除修飾。SURE感受態(tài)細(xì)胞針對(duì)uvrC,umuC,SbcC 和RecJ等參與修飾的大腸桿菌基因或蛋白進(jìn)行突變,提高了真核來(lái)源、不規(guī)則DNA的穩(wěn)定性達(dá)20倍以上,并且適合克隆甲基化DNA。

本身具有Kana和Tet抗性。當(dāng)轉(zhuǎn)化氯霉素抗性質(zhì)粒到sure感受態(tài)細(xì)胞中時(shí),一定要用100 ug/ml的氯霉素平板去篩選。因?yàn)閟ure感受態(tài)細(xì)胞在40ug/ul的氯霉素條件下具有抗性,而對(duì)于100ug/ul的氯霉素抗生素具有敏感性。

sure感受態(tài)細(xì)胞可以用于藍(lán)白斑篩選,具有l(wèi)az互補(bǔ)基因。

在載體構(gòu)建過(guò)程中,我們經(jīng)常會(huì)遇到一些基因片段具有高度的重復(fù),這導(dǎo)致插入載體中的序列可能會(huì)在細(xì)菌擴(kuò)增中不穩(wěn)定,在質(zhì)粒擴(kuò)增中產(chǎn)生形成片段的缺失和重排,如發(fā)現(xiàn)插入片段高頻率地產(chǎn)生缺失和重排,可以嘗試使用重組缺陷大腸桿菌菌株,例如sure感受態(tài)細(xì)胞。

感受態(tài)細(xì)胞特點(diǎn)和簡(jiǎn)介

感受態(tài)細(xì)胞制備方法

感受態(tài)細(xì)胞操作方法

感受態(tài)細(xì)胞注意事項(xiàng)

感受態(tài)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)pdf版和相關(guān)資料下載

感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)用舉例

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