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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:DH10Bac

  • 產(chǎn)品型號:
  • 產(chǎn)品廠商:乾思生物
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
DH10Bac
詳情介紹:

感受態(tài)細(xì)胞基本信息

出品公司: Invitrogen
感受態(tài)細(xì)胞名稱: DH10Bac
菌株類型: E.coli
產(chǎn)品目錄號: 10361-012
培養(yǎng)基: LB培養(yǎng)基
生長條件: 37 ℃,  有氧
基因型: DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞菌株基因型
抗性: 卡那,四環(huán)素
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化條件: 42 ℃熱激
應(yīng)用: 重組桿粒生產(chǎn)菌株
誘導(dǎo)方法: --
菌株特點:
DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞是用來生產(chǎn)用于真核細(xì)胞蛋白表達(dá)的重組桿狀病毒分子。

高效DH10Bac細(xì)胞含有父Bacmid的bMON14272和輔助質(zhì)粒pMON7124。父Bacmid的包含一個小型F復(fù)制子,卡鈉霉素抗性基因,attTn7重組位點和lacZα互補因子。輔助質(zhì)粒包含的tnsABCD的區(qū)域,提供了轉(zhuǎn)座蛋白,這些轉(zhuǎn)座蛋白可以 供體質(zhì)粒(Donor plasmid)上的小Tn7位點插入到父本Bacmid的重組目的位點。輔助質(zhì)粒pMON7124包含有四環(huán)素抗性(Tetracycline).

DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞本身含有卡那霉素和四環(huán)素抗性。在制作感受態(tài)細(xì)胞的時候,需要加入這兩種抗生素,以防止DH10Bac中的質(zhì)粒父本桿粒bMON14272(卡那霉素抗性)和輔助質(zhì)粒pMON7124(四環(huán)素抗性)在細(xì)胞擴(kuò)增過程中丟失,提高質(zhì)粒轉(zhuǎn)化后的基因轉(zhuǎn)座效率。

攜帶Tn7轉(zhuǎn)座元件的 供體質(zhì)粒pFastBac,含有慶大霉素抗性基因,桿狀病毒多角體啟動子,一個多克隆位點區(qū)域和SV40的poolyadenylation信號。 重組的Bacmid分子通過將多克隆位點包含有基因編碼序列的 供體質(zhì)粒pFastBa質(zhì)粒DH10Ba感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化與在編碼序列克隆到多個克隆網(wǎng)站(重組成功的質(zhì)粒在選擇性培養(yǎng)基平板上呈現(xiàn)為白色菌落)。然后可以將重組Bacmid進(jìn)行挑菌,小量提取分離并且轉(zhuǎn)染到昆蟲細(xì)胞,從而進(jìn)行感染重組桿狀病毒顆粒生產(chǎn)。

高效DH10Ba感受態(tài)細(xì)胞的能夠有效抵抗連接酶和連接酶緩沖液,同時可以容忍少量未稀釋的連接反應(yīng)。 φ80dlacZDM15標(biāo)記可以利用Bacmid載體中的β-半乳糖苷酶基因α-互補使用含X-gal平板培養(yǎng)基的藍(lán)白斑菌落篩選。

綜上所述,DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞本身含有卡那霉素和四環(huán)素抗性,而供體質(zhì)粒pFastbac含有慶大霉素的抗性,所以在制備DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞時需要在培養(yǎng)時添加卡那霉素和四環(huán)素,而在制備桿粒時需要使用卡那霉素,四環(huán)素,慶大霉素的三抗平板。

感受態(tài)細(xì)胞特點和簡介

感受態(tài)細(xì)胞制備方法

感受態(tài)細(xì)胞操作方法

感受態(tài)細(xì)胞注意事項

感受態(tài)細(xì)胞說明書pdf版和相關(guān)資料下載

感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)用舉例

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